română | русский | english

Autor: Ciobanu Lucia Gradul: doctor în medicină Specialitatea:  14.00.06 - Cardiologie şi reumatologie Anul: 2009 Conducător ştiinţific: Victoria Ivanov doctor habilitat, profesor cercetător, Instituţia Medico-Sanitara Publică Institutul de Cardiologie Instituţia: CSS:

Statut Teza a fost susţinută pe 5 martie 2009 în CSS şi aprobată de CNAA pe 23 aprilie 2009 Autoreferat – 0.42 Mb / în română Teza CZU 616.127-005.8-074: 546.41+543.9:546.41 0.73 Mb / în română 94 pagini

Cuvinte Cheie

Adnotare

Prezentul studiu şi-a propus drept obiectiv elaborarea unui test-sistem diagnostic de determinare a Ca2+-ATP-azei reticulului sarcoplasmatic (RS) şi studierea posibilităţii de utilizare a Ca2+-ATP-azei RS pe poziţia de marcher bilogic al infarctului miocardic acut (IMA).

Pentru elaborarea test-sistemului de depistare a Ca2+-ATP-azei RS s-a utilizat metoda ELISA, care se distinge dintre tehnicile imunoenzimatice ce se practică la etapa actuală prin calităţi de înaltă senisbilitate şi specificitate. Având la dispoziţie vezicule de RS cu continut inalt de Ca2+-ATP-aza (S.Sîrbu şi coaut., 1986) şi aplicând varianta clasică de hibridizare (inducerea sintezei de anticorpi specifici la administrarea Ca2+-ATP-azei, fuzionarea limfocitelor producătoare de anticorpi cu celule de mielom, administrarea lor intraperitoneala la soareci pentru a obţine sinteza unor cantităţi mari de anticorpi monoclonali), am obţinut anticorpi monoclonali specifici faţă de Ca2+-ATP-aza RS din categoria a două clase de imunoglobuline (IgM şi IgG).

Criteriul operaţional al acestui procedeu constă în faptul, că pe godeurile planşetelor de lucru se aplică anticorpii monoclonali către proteina Ca2+-ATP-aza RS. Mostrele de cercetare care conţin Ca2+-ATP-ază se incubează şi această proteină se leagă cu anticorpul monoclonal, rezultând complexul Ac-antigen - Ac Ca2+-ATP-aza RS. În continuare toate proteinele neconjugate se extrag şi se adaugă conjugatul Ac – peroxidază de hrean - enzimă care în rezultatul asocierii a Ac şi Ag induce apariţia culorii, iar intensitatea acesteia, estimată în unităţi de densitate optică, se corelează cantitativ pozitiv.

Pentru validarea test sistemului elaborat am inclus în studiu 56 pacienţi cu Q IMA, diagnosticul cărora se confirmase inclusiv prin elevarea biomarcherilor uzual acceptaţi ai necrozei miocardice (troponina şi CFK-MB). Prezenţa Ca2+-ATP-azei RS în sângele bolnavilor de IMA s-a determinat în procedură cantitativă şi calitativă.

Ca2+-ATP-aza RS s-a apreciat crescută la toţi bolnavii încadraţi în studiu: aceasta îşi face apariţia la aproximativ 4-6 ore postdebut şi dispare la 144 ore (6 zile) de la declanşarea IMA. De altfel titrele sangvine ale Ca2+-ATP-azei RS se corelează concludent cu masa miocardului afectat. La aceiaşi pacienţi s-au evaluat în paralel şi marcherii recunoscuţi ai necrozei cardiomiocitelor - CFK-MB şi troponina (în test calitativ), studiul comparat determinând corelaţii fidele ale acestor teste cu valorile determinate de noul test imunoenzimatic.

Denotă despre specificitatea noului test-sistem imunoenzimatic faptul că Ca2+-ATP-aza RS nu s-a găsit în sângele pacienţilor cu traumatisme musculare acute, nici la bolnavii supuşi hemodializei din cauza insuficienţei renale şi nici la bolnavii cu sindrom coronarian acut.

Prin urmare, s-a demonstrat că Ca2+-ATP-aza RS este un marcher biologic sugestiv al injuriilor miocardului, iar determinarea ei în sânge poate fi utilizată în diagnosticul IMA.

Cuprins

Referenţi Oficiali

• Valeriu Revenco
  doctor habilitat, profesor universitar, Universitatea de Stat de Medicină şi Farmacie "Nicolae Testemiţanu"
• Valentin Gudumac
  doctor habilitat, profesor universitar, Universitatea de Stat de Medicină şi Farmacie "Nicolae Testemiţanu"

 Teze

În examinare [1] :

• Impactul clinic și social al artritei psoriazice
  16 martie 2023

Arhiva tezelor:
Selectaţi anul2022 [3]2021 [2]2020 [2]2019 [5]2018 [1]2017 [3]2016 [3]2015 [5]2012 [2]2011 [6]2010 [5]2009 [8]2008 [5]2007 [5]2006 [4]2005 [1]2004 [1]

[...] Acte Normative