Comisia de atestare
Comisia de acreditare
Comisiile de experţi
Dispoziţii, instrucţiuni
Acte normative
PREGĂTIREA CADRELOR
Nomenclator
Instituţii
Consilii
Seminare
Teze		 Conducători de doctorat
Deţinători de grad
Doctoranzi
Postdoctoranzi
CNAA logo

 română | русский | english

CNAA / Teze / 2009 / august /

Cercetarea proceselor de dezvoltare şi multiplicare microclonală in vitro la Actinidia chinensis Planch


Autor: Romanciuc Gabriela
Gradul:doctor în biologie
Specialitatea: 03.00.05 - Botanică
Anul:2009
Conducător ştiinţific: Alexandru Ciubotaru
doctor habilitat, profesor universitar, Grădina Botanică Naţională (Institut)
Instituţia:
CSS:

Statut

Teza a fost susţinută pe 11 august 2009 în CSS
şi aprobată de CNAA pe 1 octombrie 2009

Autoreferat

Adobe PDF document – 0.49 Mb / în română

Cuvinte Cheie

Actinidia chinensis, cultura in vitro, mediul de cultură, calus, fitohormoni, centre meristematice, organogeneza, plantule regenerate.

Adnotare

Lucrarea prezintă rezultatele cercetării în domeniul cultivării în condiţii in vitro a speciei Actinidia chinensis Planch. Scopul acestui studiu constituie testarea fazelor de iniţiere şi multiplicare in vitro a speciei luată în studiu, prin optimizarea mediilor de cultură şi a balanţei hormonale. Capacitatea proliferativă şi organogenetică a calusului obţinut a fost studiată pe o durată de 6-7 subculturi.

Ca explante primare au fost utilizate fragmente de frunze şi peţiol, la nivelul cărora s-a efectuat un studiu comparat al capacităţii de regenerare. La etapa de iniţiere a culturi in vitro în calitate de medii nutritive au fost folosite mediile MS, B5, S 2,5, suplinite cu regulatorii de creştere BAP, zeatină, IBA, ANA, 2,4 -D, 2 IP şi GA3. În dependenţă de etapa de cultivare s-a recurs la utilizarea unui raport diferit de fitohormoni. Fragmente de ţesuturi în primele 7 zile, au fost menţinute la întuneric, care mai apoi, au fost transferate în camera de cultivare, creându-se condiţii optime de creştere şi dezvoltare ca: fotoperioadă 16 ore lumină şi 8 ore întuneric, temperatura de 24 ± 1°C. Iniţial formarea calusului a avut loc pe mediul S 2,5, după 14 zile de cultivare, ce reprezenta o structură compactă de un verde intens. În urma analizei histologice la nivel de ţesut calusal au fost puse în evidenţă formarea a două tipuri de calus: morfogen şi nonmorfogen.

Iniţierea proceselor morfogenetice la nivel de calus a fost condiţionată de formarea centrelor morfogene, constituite din celule meristematice, ce au capacitatea de a prolifera şi regenera. Cultivarea ulterioară a ţesutului calusal pe mediul de regenerare S 2,5 suplinit cu 1,0 mg/l BAP şi 1,0 mg/l GA3 a condus la evoluţia centrelor morfogene, soldate cu înregistrarea organogenezei indirecte manifestate prin formarea mugurilor - caulogeneza, atestată pe mediul S 2,5 şi paralel, formarea rădăcinilor (rizogeneza) pe mediul B5. Cercetările efectuate la această etapă de cultivare au permis de a face concluzia că anume mediul 2,5 S este cel mai eficient pentru regenerarea Actinidia chinensis în condiţii in vitro. Formarea plantulelor pe mediul S 2,5 a fost constatată după 4-5 luni de cultivare, după care a urmat etapa de înrădăcinare. Plantulele regenerate au fost plantate în vase de cultură şi transferate în seră, pentru creşterea şi dezvoltarea ulterioară

Cuprins


1. REVIUL LITERATURII
  • 1.1. Genul Actinidia – o nouă specie pomicolă pentru Republica Moldova
  • 1.1.1. Istoria şi importanţa Actinidiei
  • 1.1.2. Caracteristica botanică a Actinidiei
  • 1.1.3. Clasificarea genului Actinidia
  • 1.2. Tehnologia de cultură in vitro a ţesuturilor vegetale
  • 1.3. Particularităţile înmulţirii genului Actinidia în condiţii de cultură in vitro

2. MATERIAL DE STUDIU ŞI METODE DE CERCETARE
  • 2.1. Material de studiu
  • 2.1.1. Cerinţe faţă de factorii ecologici
  • 2.2. Metode şi procedee de cercetare
  • 2.2.1. Prepararea mediilor de cultură
  • 2.2.2. Procedura de sterilizare a veselei, mediului de cultură şi materialului iniţial
  • 2.2.3. Inocularea
  • 2.2.5. Transferul plantulelor din condiţiile in vitro în ex vitro
  • 2.2.6. Pregătirea secţiunilor semifine
  • 2.2.7. Prelucrarea statistică a datelor

3. CAPITOLUL III. PARTICULARITĂŢILE BIOMORFOLOGICE DE DEZVOLTARE A PLANTELOR DE ACTINIDIA CHINENSIS PLANCH. ÎN TEREN PROTEJAT
  • 3.1. Particularităţile morfoanatomice ale speciei Actinidia chinensis
  • 3.2. Caracteristica suprafeţei foliare .
  • 3.3. Studierea particularităţilor morfologice ale florii
  • 3.4. Morfologia rădăcinii

4. INFLUENŢA FACTORILOR EXOGENI ŞI ENDOGENI ASUPRA PROCESULUI DE CALUSOGENEZĂ ŞI MORFOGENEZĂ IN VITRO
  • 4.1. Particularităţile acţiunii citochininelor la etapele iniţiale de inducere a calusogenezei
  • 4.2. Influenţa explantului, a mediului de cultură şi a regulatorilor de creştere asupra
  • activităţii calusului
  • 4.3. Interacţiunea factorilor mediul de cultură – explant - regulatorii de creştere
  • 4.4. Dinamică dezvoltării explantelor limb foliar şi peţiol la Actinidia chinensis
  • cultivate in vitro
  • 4.5. Studierea aspectelor histologice la nivel de calus

5. ORGANOGENEZA „IN VITRO” LA ACTINIDIA CHINENSIS
  • 5.1. Acţiunea factorilor mediul de cultură, explant şi regulatori de creştere asupra iniţierii proceselor de organogeneză
  • 5.2. Analiza histologică comparativă a centrelor meristematice
  • 5.3. Diferenţierea centrelor meristematice în procesul de regenerare a calusului
  • 5.4. Analiza comparată a minilăstarilor
  • 5.5. Testarea potenţialului de înrădăcinare in vitro